小鼠免疫细胞分选

使用EasySep™简化您的小鼠研究工作流程

随着小鼠研究的发展和实验模型的日趋专业化，每一个样本都比以往任何时候都更加重要。EasySep™小鼠细胞分选试剂盒可帮助您从包括复杂和人源化系统在内的多种组织和模型中回收高质量细胞，同时保持细胞的表型和功能。EasySep™通过最大程度地减少细胞损失并标准化关键步骤，可让不同实验和操作者之间实现稳定、可重复且可放大的实验结果。无论您是处理有限的组织样本、正在过渡到前沿的实验模型，还是为了提高效率而优化工作流程，EasySep™都能为流式细胞术、细胞培养和分子生物学等下游应用提供可靠的细胞分选。

为什么选择EasySep™进行小鼠细胞分选？

简单且高效。只需较少的处理步骤，最快15分钟即可完成小鼠细胞分选。
高纯度和高回收率。可实现高达99%的细胞纯度，并获得高回收率。
无需分离柱。无需分离柱和清洗步骤即可获得具有活性的功能性细胞。
通用性强。可从包括脾脏、血液、骨髓等在内的多种小鼠组织中分选细胞。
经过验证。 20多年来广泛用于已发表的研究中，支持各种下游应用。

细胞分选方法性能表现：细胞纯度与回收率整合的工作流程和资源

细胞分选方法

多种细胞分选方法可用于小鼠研究，每种方法均适用于不同的细胞群体、样本类型和下游应用。EasySep™使用免疫磁珠细胞分选技术，简化您从小鼠样本中分选细胞的过程。抗体复合物结合特定的细胞表面标记物，然后将目标细胞与磁珠相结合。当样本置于EasySep™磁极中时，标记细胞会被分离，从而使您可以轻松分离目标细胞或去除不需要的细胞。该方法降低了工作流程的复杂性，并能够高效处理多种小鼠组织，包括脾脏、淋巴结、骨髓、肿瘤样本等。

磁珠分选如何支持小鼠细胞分选

保留细胞的原始特征，用于下游功能和表型分析
兼容多种小鼠模型，包括人源化系统
支持多种分选策略，包括：

何时使用正选与负选方法分离细胞

正选和负选方法在小鼠细胞分选工作流程中各有用途。负选通常用于分离无磁珠标记的细胞以进行功能检测。相比之下，正选直接标记并分离目标细胞，在需要高纯度或富集特定细胞时非常有用。具体选择取决于您的下游应用、样本类型和实验目标。如果您需要帮助，请通过 techsupport.cn@stemcell.com 联系我们。

为什么在小鼠细胞分选中使用负选？

当维持细胞的原始特征至关重要时，负选被广泛用于小鼠细胞分选工作流程。负选无需标记目标细胞，而是通过抗体复合物和磁珠去除不需要的细胞，从而让您能分离获得处于原始状态、无磁珠标记的细胞。

我们使用EasySep™（CD4+和CD8+ T细胞负选试剂盒、小鼠B细胞分选试剂盒以及小鼠Pan-DC富集试剂盒），是因为其不仅易于使用，且制备出的细胞纯度高。我特别喜欢这些负选试剂盒，因为它们能让我们收集到的细胞尽可能保持未受扰动的状态。

Eric Song，医学博士/博士，耶鲁大学

这种方法对于看重功能和表型准确性的应用特别有价值，包括免疫分析、细胞培养以及使用复杂或人源化小鼠模型的转化研究。负选还有助于保留用于免疫表型分析的细胞表面标志物，并支持用于下游转录组分析的RNA完整性。

图1. 典型的EasySep™小鼠细胞分选实验流程（负选）

EasySep™负选试剂盒能够分离出无磁珠标记的小鼠细胞，包括B细胞、T细胞和NK细胞，并且可直接用于下游应用。参考我们全系列的细胞负选试剂盒。

比较小鼠细胞分选方法

如果您正在比较分选方法或优化工作流程，这些资源可以提供帮助：

EasySep™磁极在细胞分选工作流程中同时处理八个血液样本，科研人员正在用移液枪转移液体。

磁珠分选与其他方法对比

对比磁珠分选与其他细胞分离技术。

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科研人员正在细胞分选工作流程中使用EasySep™磁极，将分选后的细胞悬液倒入收集管中。

EasySep™常见问题解答（FAQs）

了解有关EasySep™细胞分离、产品兼容性、样本申请等更多信息。

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性能表现：细胞纯度与回收率

EasySep™小鼠细胞分选试剂盒通过快速处理简化了小鼠细胞分选工作流程，确保了高细胞纯度和回收率，适用于多种小鼠细胞类型和组织。此外，EasySep™技术无需分离柱，减少了对细胞的机械应力，从而保持细胞功能性并最大程度提高得率。与基于分离柱的细胞分选方法相比，EasySep™可提供等效或更高的细胞纯度和回收率。以下示例重点介绍了常见小鼠细胞分选工作流程中的典型分选时间、纯度流式图和对比性能。

图2. 使用EasySep™分选高纯度的小鼠B细胞

以小鼠脾细胞为起始样本，使用EasySep™小鼠B细胞分选试剂盒（产品号 #19854）和EasySep™磁极（产品号 #18000），分选后的B细胞含量（CD19+CD3-）为97.6 - 99.3%。

图3. 使用EasySep™分选高纯度的小鼠CD4+ T细胞

以小鼠脾细胞为起始样本，使用EasySep™小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒（产品号 #19852）和EasySep™磁极（产品号 #18000），分选后的CD4+ T细胞含量（CD3+CD4+）为95.4 - 98.4%。

我目前使用EasySep™小鼠T细胞分选试剂盒、CD4+ T细胞分选试剂盒和CD8+ T细胞分选试剂盒。多年来我使用过不同的分选试剂盒，在我看来，EasySep™试剂盒的效果更胜一筹。
我还使用过Biovision、Thermofisher、Novus和Miltenyi的产品进行T细胞和单核细胞分选。相比之下，STEMCELL的试剂盒让我获得了更好的纯度和活率，而且STEMCELL试剂盒的分选方案耗时更短。

Cori Fain，博士研究生，梅奥诊所

从使用EasySep™进行细胞分选，到使用ImmunoCult™进行培养、活化、扩增和分化，从而简化您的小鼠T细胞研究。探索用于CD4+、CD8+、naïve、记忆、调节性及其他特异性T细胞亚群的EasySep™小鼠T细胞分选试剂盒。

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图4. 使用EasySep™进行小鼠CD11b+细胞分选可实现与基于分离柱方法相当或更高的纯度和回收率

使用EasySep™小鼠CD11b正选试剂盒II（产品号 #18970）或基于分离柱的替代方法，从小鼠脾脏中通过正选分离CD11b+细胞。我们对竞品的标准方案及其需要额外分离柱的可选"高纯度"方案进行了测试。EasySep™细胞分选实现了相当或更好的（A）纯度和（B）回收率。数据以平均值±SEM显示；n=4-6。

在细胞分选后难以计算细胞回收率或检测纯度？这份快速指南将引导您完成这两个步骤，包括细胞计数和流式细胞术技巧，以帮助您获得可靠的结果。

使用下表1查找适合您细胞类型和组织来源的EasySep™小鼠细胞分选试剂盒，并比较常见细胞类型的典型细胞纯度和流程时长，包括来自脾脏的T细胞、NK细胞和树突状细胞，以及来自外周血（PBMCs）的单核细胞等。

表1. 使用EasySep™分选常见小鼠细胞类型的典型细胞纯度和实验时长

小鼠细胞类型（EasySep™试剂盒）	组织/样本来源	典型细胞纯度（%）	预计实验时长（分钟）*
B细胞	脾脏	96 - 99	15
Pan-B细胞（含B-1、B-2和浆细胞）	脾脏	91 - 98	10
T细胞	脾脏	95 - 99	15
CD4+ T细胞	脾脏	92 - 98	15
CD8+ T细胞	脾脏	94 - 95	17.5
调节性T细胞（Tregs；CD4⁺CD25⁺）	脾脏	70 - 93	72.5
调节性T细胞（Tregs；CD4⁺CD304⁺）	脾脏	88 - 94	41.5
调节性T细胞（Tregs；CD4⁺CD304⁺）	淋巴结	91 - 93	41.5
Pan-Naïve T细胞	脾脏	90 - 97	15
NK细胞	脾脏	67 - 89	25
树突状细胞	脾脏	52 - 63	13
单核细胞	骨髓	85 - 94	19
巨噬细胞（F4/80+细胞）	脾脏	87 - 93	27
	肺	92 - 95	35
	腹腔灌洗液	97	24
	肝脏	80 - 90	30
髓系来源抑制性细胞（MDSCs；CD11b⁺Gr1⁺）	Naïve C57BL/6脾细胞	81 - 91	18
髓系来源抑制性细胞（MDSCs；CD11b⁺Gr1⁺）	荷瘤BALB/c脾细胞	92 - 96	18
造血祖细胞	骨髓	60 - 84	31

*实验时长基于产品说明书（PIS）中描述的孵育、分选和离心步骤，不包含样本制备、处理或用户操作时间。

注意： 您可选择适用于特殊细胞群体和亚型的更多试剂盒。上述细胞纯度数值为来自每个特定试剂盒产品说明书"数据"部分的实验数据。

挂图预览，展示了常见小鼠免疫细胞类型（包括T细胞、B细胞、NK细胞和单核细胞）在脾脏、骨髓、淋巴结和外周血等不同细胞来源中的预期比例。

小鼠免疫细胞类型、比例与标志物

参考常见小鼠免疫细胞群（涵盖脾脏、骨髓、外周血等）的细胞比例、白细胞百分比、表型标志物及推荐的EasySep™试剂盒。

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整合的工作流程与资源

简化的小鼠细胞分选工作流程始于一致的样本制备，通过手动或自动化组织解离方法从小鼠组织中制备高质量的单细胞悬液。STEMprep™支持自动化组织处理并生成小鼠组织单细胞悬液。随后，这些单细胞悬液可使用EasySep™进行细胞分选获得目标细胞，用于免疫谱分析、流式细胞术和转化研究等下游应用。探索下方的资源，了解小鼠样本制备工具、细胞分选方案及下游应用。